重新创建虚拟目录为我解决了这个问题。

(在此之前，我尝试了这里列出的其他建议，如清理解决方案，删除bin文件夹，重建解决方案等。没有一个工作，直到我重新创建虚拟目录)

Debug ->调试属性-> Web ->创建虚拟目录

TL;DR:对我来说，在尝试了3天我能在这里找到的所有其他答案之后，最终的解决方案是在我的IIS应用程序池高级设置中将启用32位应用程序设置为True，然后重新创建临时ASP。并为我的IIS_IUSRS组增加“修改”和“写入”权限。

我尝试的步骤:

Completely clean and rebuild solution. Shut down and restart Visual Studio. Delete Temporary ASP.NET Files directories (C:\Windows\Microsoft.NET\Framework*). This is where my problems really started: I deleted too much. Reboot development machine. Remove .vs folder and rebuild solution. Recreate C:\Windows\Microsoft.NET\Framework\v4.0.30319\Temporary ASP.NET Files. My projects are 64-bit applications, even though build platform is AnyCPU. Verify output directory was set to bin/ on web projects. Wipe out and check out a clean copy of my version control branch. Wipe out and clone a fresh copy of my version control repository. Run Windows update to latest versions of .NET Frameworks. Repair, uninstall, and reinstall .NET Frameworks 3.5 and 4.8. Uninstall and reinstall Visual Studio 2019 Professional. Uninstall and reinstall the Internet Information Services feature in Windows. Downgrade ASP.NET NuGet package and rebuild solution (issued reference errors due to changes in assemblies). Upgrade ASP.NET back to what my projects were using and rebuild solution. Recreate IIS virtual directory through web project's Web properties. Created "empty" Global.asax files. Restore my files after no change. Replace Codebehind="Global.asax.cs" with Codefile="Global.asax.cs". This started showing me load errors for references to assemblies that actually existed in the system. Enable 32-bit applications in IIS application pool. This started displaying an access error to a 32-bit temporary directory. Restore permissions to all Temporary ASP.NET Files directories (add all but Full Control). This finally got my web application working again.

我能够从网上找到的无数答案中拼凑出足够的信息。在搜索iis找不到引用的。net dll后找到了这个答案，我尝试了最后的几个步骤，让我再次工作，在我的第四天开始与这个令人难以置信的模糊问题作斗争。

如果有办法诊断出为什么全球。asax无法加载，而不是太通用的无法加载类型错误，没有详细信息。

这个故事的寓意:当清理临时ASP。NET Files目录，删除目录的内容，而不是目录本身。否则，可能会导致权限丢失。

我发现在项目中更改命名空间，而没有在整个解决方案中重构它是我的问题。检查你的项目属性，看看你的命名空间是什么，确保排列整齐，全面。

有两种方法:

配置管理器将dll构建显示为'64'和'any cpu'构建的混合。 将它们都放在同一个构建中可以解决这个问题。 在分支之间切换时，IIS快速路径有时不会更新。右键单击任务栏中的“IIS Express”>显示所有应用程序，并验证路径是否指向正确的分支。

我正在开发一个旧的“基于文件夹的”ASP。NET web项目(我讨厌)-并发现这是我的修复:

创建一个App_Code文件夹(如果你还没有的话)

将Global.asax.vb文件移动到App_Code文件夹中

全局中的标记。Asax可以省略任何名称空间(至少对于这种类型的项目):

<%@ Application Codebehind="Global.asax.vb" Inherits="MyApp" Language="VB" %>

…其中“MyApp”是在Global.asax.vb中定义的类的名称

我花了好几天时间研究这个问题。我最终通过以下这篇文章中的建议解决了这个问题。

将平台目标更改为任意CPU。我目前没有这个配置，所以我必须去配置管理器并添加它。我专门为x64编译。仅凭这一点并不能解决错误。 将输出路径更改为bin\而不是bin\x64\Debug。在我改变平台目标之前，我已经尝试过几次了。它只会得到一个错误，因为格式无效而无法加载程序集。

要明确的是，在它开始工作之前，我必须做这两件事。我已经尝试了多次，但它从来没有解决，直到我做了两个。

如果我将这些设置中的任何一个更改回原来的设置，我将再次得到相同的错误，尽管已经运行了Clean Solution，并手动删除了bin目录中的所有内容。